成功的曙光
禁令颁布后的一百多年，曾轰动一时的输血疗法变得无人问津。年美国医生菲利普·菲兹克完成了有记载的首例人与人之间的输血，但并没有留下详细的记录。
直到年，英国妇产科医生詹姆斯·布兰德尔频频目睹产妇因大出血而死亡，对此忍无可忍的他，先用动物进行输血实验，取得成功后，设计了一套输血器材，进行了将健康人血输给濒死之人的治疗尝试。他共为11例大失血病人输血，成功救治了其中的5例。年他在伦敦内科学会上作了关于输血的报告，他总结得出两项输血基本原则：1、只能用人血，2、只适用于大失血而濒临死亡的人。这次报告引起了极大的轰动，再次激起医学界对输血的兴趣，但当时人们对血型还一无所知，所以无法解释输血后有些病患能存活下来，有的却出现致死性的输血反应。布兰德尔开创了直接输血法，还首创了重力输血器，利用重力来作输血时的推动力，这种输血方法一直沿用了年左右。
年，英国外科医生李斯特采用了消*法，对输血器具进行消*，并在手术中采用无菌操作，为避免感染起到了重要的作用，进一步推动了输血医疗的发展。
血型和抗凝
年奥地利医生卡尔·兰德斯坦纳发现了基于红细胞表面抗原的ABO血型系统，这一划时代的发现，为人类的安全输血提供了重要保障。他因此获得年的诺贝尔医学奖，并被人尊称为“血型之父”。
年美国病理学家路德维格·赫克通建议通过献血者和受血者之间进行交叉配血来提高输血安全性，同年美国医生鲁本·奥腾伯格完成了首例使用血型和交叉配血的输血实验，此后他大力提倡血型匹配。随着研究手段的改进，人类不断发现新的红细胞血型，如Rh血型、MN血型等。
除了血型，血液凝固也是输血手术中的一大障碍。
美国外科医生克莱尔从年至年先后对55例患者进行了61次输血，其中2/3取得了成功。他改进了注射器，使用石蜡油管、注射针头、小接管、三通管、活塞等作为输血器材，让受血者和献血者同时躺在手术床上，使献血者的动脉和受血者的静脉相连接，缩短输血时间，避免血液凝固。
年开始，比利时的阿尔伯特·哈斯汀和美国的理查·路易森等人先后报导了枸橼酸盐的抗凝血作用，并提出用枸橼酸盐和葡萄糖与血液混合，在抗凝的同时可以保持红细胞活力。
这些极大地促进了输血医疗的发展，使输血从高精尖技术变为许多医生都能完成的手术，至年左右，输血手术及输血前进行交叉配血试验均已被普及。
血液的保存
年，美国病理学家威尔将枸橼酸盐抗凝的血液放在冷藏箱内保存，成为血库工作的奠基人。年战地血库开始出现在人类历史中，年伦敦有了输血服务所，对输血器具、采血及输血方法实行标准化、规范化的管理。
年美国首家血库在芝加哥成立，年二战开始时，美国已有多处输血服务所，大量献血者前来献血。
由于血库的普及，血液保存时效成为了人们